期刊简介

       本刊是1985年国家科委批准由中国药学会主办的向国内外公开发行的全国一级学术刊物,也是我国中文核心期刊之一。它的主要任务是:报道我国临床药理学专业的学术成果;交流临床药理的科学研究、药物评价、药物治疗和教学培训等工作中的经验体会;介绍国内外临床药理专业的最新进展、学术动态;促进国内与国际的学术交流;宣传与药物评价有关的药品管理学与药物治疗学的水平。刊载内容有:1.药物的临床药理学研究论文,内容包括药效学、毒理学、药代动力学、临床试验、药物相互作用、药物代谢研究及药物不良反应监测等;2.临床药理学进展及国内外研究动态综述;3.新药介绍及评价;4.药物治疗学方面的经验及问题;5.临床药理方法学的研究及介绍;6.药物临床研究指导原则等。本刊主要读者对象为临床药理工作者;广大的临床医师、药师、药理学及毒理学工作者、医药院校的师生以及从事药品研究、生产、管理的技术人员和广大医药卫生界的科技管理干部。

      

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  • 杂志名称:中国临床药理学杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国药学会
  • 国际刊号:1001-6821
  • 国内刊号:11-2220/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:期刊收录:CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 知网收录(中)
中国临床药理学杂志2011年第11期

PRL-3基因RNA干扰慢病毒载体的构建及稳定感染HepG2单克隆细胞株的建立

黄德好;苏树英;陈规划

关键词:RNA干扰, 慢病毒, PRL -3基因, 肝细胞癌
摘要:目的 构建PRL -3基因RNA干扰慢病毒载体并建立被稳定感染的HepG2单克隆细胞株.方法 设计PRL -3基因特异性RNAi靶序列,合成靶序列的DNA oligo,退火形成双链DNA,与含绿色荧光蛋白(GFP)编码基因的pGCL- GFP线性化载体连接,产生重组慢病毒质粒LV - PRL3 - siRNA,转化感受态细胞,PCR筛选阳性克隆,并测序鉴定.用Lipofectamine 2000将LV - PRL3 -siRNA、pHelper 1.0和pHelper 2.0这3种质粒共转染293T细胞,包装产生慢病毒,经孔稀释法,测定病毒滴度.重组慢病毒感染肝癌HepG2细胞,进行RealTime - PCR和Western - Blot验证PRL -3基因的沉默效果,筛选出佳干扰序列组及阴性对照组的单克隆细胞株.结果 成功构建PRL -3基因RNA干扰慢病毒载体并获得相应的慢病毒,浓缩病毒悬液的滴度为6E+8 Tu·mL-.重组慢病毒对HepG2细胞PRL -3基因表达有明显沉默作用,其中第一干扰序列效果明显.筛选出佳干扰序列组及阴性对照组的单克隆肝癌细胞株.结论 成功构建人PRL -3基因特异性的慢病毒干扰载体,并筛选出佳干扰序列组及阴性对照组的单克隆肝癌细胞株.