期刊简介
本刊是1985年国家科委批准由中国药学会主办的向国内外公开发行的全国一级学术刊物，也是我国中文核心期刊之一。它的主要任务是：报道我国临床药理学专业的学术成果;交流临床药理的科学研究、药物评价、药物治疗和教学培训等工作中的经验体会;介绍国内外临床药理专业的最新进展、学术动态;促进国内与国际的学术交流;宣传与药物评价有关的药品管理学与药物治疗学的水平。刊载内容有：1.药物的临床药理学研究论文，内容包括药效学、毒理学、药代动力学、临床试验、药物相互作用、药物代谢研究及药物不良反应监测等;2.临床药理学进展及国内外研究动态综述;3.新药介绍及评价;4.药物治疗学方面的经验及问题;5.临床药理方法学的研究及介绍;6.药物临床研究指导原则等。本刊主要读者对象为临床药理工作者;广大的临床医师、药师、药理学及毒理学工作者、医药院校的师生以及从事药品研究、生产、管理的技术人员和广大医药卫生界的科技管理干部。
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首页>中国临床药理学杂志
- 杂志名称：中国临床药理学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中国药学会
- 国际刊号：1001-6821
- 国内刊号：11-2220/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：期刊收录：CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 知网收录(中)
慢病毒载体法建立乳腺癌ST3Gal Ⅲ基因RNAi细胞模型
宋娟；王宏兰；王玉春；田华；夏春辉；沈业彤；崔红霞
关键词：ST3Gal Ⅲ基因, RNA干扰, 转染, 表达
摘要：目的 研究用慢病毒载体法建立乳腺癌α2,3-唾液酸转移酶ST3 GalⅢ基因RNA干扰(RNAi)的细胞模型.方法 针对ST3 Gal Ⅲ基因设计4组短发夹RNA序列,合成DNA与线性化的pGLV3-H1-GFP载体连接,构建慢病毒载体质粒.鉴定后,进行病毒包装和病毒滴度检测;将获得的重组慢病毒pGLV3-H1-GFP-shST3转染人乳腺癌MDA-MB-231细胞后,将转染细胞分为3组:空白组,未转染组(mock cells,M);对照组(转染对照慢病毒,parent cells,P);干扰组,转染慢病毒载体pGLV5-H1-GFP-shST3(shST3-1,2,3,4).以荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达,经嘌呤霉素抗性筛选;用实时定量PCR 、Western blot检测转染后MDA-MB-231细胞中ST3Gal ⅢmRNA及蛋白表达,以流式细胞术分析细胞表面α2,3-唾液酸水平.结果 成功构建针对ST3Gal Ⅲ基因的RNAi慢病毒载体,病毒悬液滴度均＞2×108TU·mL-1.各转染细胞的转染效率达90％以上;经嘌呤霉素筛选后,干扰组的ST3 GalⅢmRNA的抑制率分别为42.1％,66.7％,30.1％,80.9％及蛋白表达水平分别下降了35.92％,75.64％,37.12％,81.75％.与对照组比较,干扰组细胞ST3 GalⅢ基因的mRNA及蛋白表达显著降低,差异有统计学意义(P ＜0.05);shST3-4组细胞表面α2,3-唾液酸水平明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 成功构建了乳腺癌ST3Gal Ⅲ基因RNAi的细胞模型shST3-4.
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